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簡(jiǎn)要描述：體外染色體畸變試劑盒省去陽(yáng)性底物成分準備、誘導 S9 制備，可以直接使用，大大縮短了實(shí)驗周期；試劑盒各成分均經(jīng)過(guò)嚴格的質(zhì)量檢測，無(wú)雜菌污染，誘導 S9 活性均符合染色體畸變試驗要求，實(shí)驗結果準確、可靠、重現性高。染色體畸變試驗試劑盒應用廣泛，可進(jìn)行食品、化學(xué)品、農藥、消毒劑、食品添加劑、藥物殘留、化妝品、容器與包裝材料等多個(gè)方面的遺傳毒理學(xué)檢測。
產(chǎn)品型號：221011廠(chǎng)商性質(zhì)：生產(chǎn)廠(chǎng)家更新時(shí)間：2024-01-02訪(fǎng) 問(wèn) 量：3796產(chǎn)品分類(lèi)
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| 品牌 | IPHASE | CAS | 無(wú) |
|---|---|---|---|
| 分子式 | 無(wú) | 純度 | 無(wú) |
| 分子量 | 無(wú) | 貨號 | 221011 |
| 規格 | 5mL×20 體系/盒 | 供貨周期 | 現貨 |
| 主要用途 | 遺傳毒性試驗,體外染色體畸變試驗 | 應用領(lǐng)域 | 醫療衛生,生物產(chǎn)業(yè),制藥 |
體外染色體畸變試驗
體外染色體畸變試驗的目的是檢測培養的哺乳動(dòng)物細胞染色體結構畸變。結構畸變可份為染色體型和染色單體型。大多數化學(xué)致突變物誘導染色單體型突變，但染色體型突都也可發(fā)生。多倍體增加表明受試物可導致染色體數目畸變。但是，本方法不用于檢測數目畸變。染色體突變和相關(guān)事件可以引起很多人類(lèi)遺傳性疾病，并且有證據表明，引起體胡魔癌基因和抑癌基因改變的染色體突變以及相關(guān)事件，與人類(lèi)和實(shí)驗動(dòng)物的腫瘤發(fā)生有關(guān)。體外柴色體畸變試驗可應用于已建立的細胞系、細胞株或原代細胞培養，根據培養生長(cháng)能力、核型的穩定性、染色體數目、染色體差異以及染色體響變的自發(fā)頻率選擇合適的細胞。
體外染色體畸變試劑盒 IPHASE in vitro mammalian chromosome aberration test kit (CHL)
北京匯智泰康醫藥技術(shù)有限公司針對染色體畸變試驗開(kāi)發(fā)染色體畸變試驗試劑盒， 本試劑盒省去了陽(yáng)性底物成分準備、誘導 S9 制備，可以直接使用，大大縮短了實(shí)驗周期；試劑盒各成分均經(jīng)過(guò)嚴格的質(zhì)量檢測，無(wú)雜菌污染，誘導 S9 活性均符合染色體畸變試驗要求，實(shí)驗結果準確、可靠、重現性高。染色體畸變試驗試劑盒應用廣泛，可進(jìn)行食品、化學(xué)品、農藥、消毒劑、食品添加劑、藥物殘留、化妝品、容器與包裝材料等多個(gè)方面的遺傳毒理學(xué)檢測。
體外染色體畸變試劑盒使用說(shuō)明書(shū)
【試驗原理】
在加入和不加入代謝活化系統的條件下，使培養的哺乳類(lèi)動(dòng)物細胞暴露于受試物中，用中期分裂相阻斷劑秋水仙素進(jìn)行處理，使細胞停止在中期分裂相，隨后收獲細胞、制片、染色并分析受試物是否誘發(fā)體外培養的哺乳類(lèi)細胞染色體畸變，從而評價(jià)受試物致突變的可能性。
【產(chǎn)品組成】
| 組分 | 規格 | 數量 | 使用說(shuō)明 | 保存條件 |
| S9復合物 | 2mL | 1 | / | -70℃ |
| 磷酸鹽緩沖液 | 10 mL | 1 | 使用前混勻 | |
| （CP） | 0.5 mL | 1 | 800 μg/mL，使用前混勻 | |
| 四列毒C（MMC） | 0.5mL | 2 | 20 μg/mL，使用前混勻 | |
| 秋水仙素 | 1.5 mL | 1 | 20 μg/mL，使用前混勻 | |
| 中國倉鼠肺細胞（CHL） | 1 mL | 1 | / |
【產(chǎn)品使用說(shuō)明】
1、細胞復蘇
從-70冰箱取出細胞，于37℃水浴融化，1000rpm離心5min，棄上清，用含10%牛血清RPMI 1640培養液（RPMI-10）中重懸細胞；1000rpm再次離心5min，棄上清，用RPMI-10重懸后接種于細胞瓶中培養。
2、細胞準備
將處于對數生長(cháng)期，貼壁生長(cháng)良好的CHL細胞用0.25 %（ Trypsin-EDTA）消化處理制成細胞懸液，5 mL/瓶接種于25cm2細胞培養瓶中，于37℃、5%二氧化碳培養箱中加濕培養約24 h-48h。
3、染毒處理
吸去培養瓶中培養液，加入一定濃度的受試物、S9混合液（不加S9混合液時(shí)，需用培養液補足）以及一定量不含血清的培養液，于培養箱中處理6h。在收獲細胞前4 h加入細胞分裂中期阻斷劑秋水仙素溶液（終濃度為0.2 mg/mL）。具體試驗方案見(jiàn)下表：
1）S9混合液配制
| S9混合液配制（10mL） | ||
| S9復合物 | 1.6mL | 現配現用。使用過(guò)程中，于冰浴條件下保存。 試驗結束后，剩余溶液應丟棄，不可重復使用。 |
| 磷酸鹽緩沖液 | 8.4mL | |
2）推薦染毒培養體系配制方案（以3個(gè)受試物劑量組為例）
| 處理方式 | 組別 | 培養液體積（mL） | S9混合液體積（mL） | 受試物體積（mL） | 溶劑體積（mL） | 陽(yáng)性對照體積（mL） | |
| CP | MMC | ||||||
| 活化 | 陽(yáng)性對照 | 4.45 | 0.5 | / | / | 0.05 | / |
| 劑量1 | 4.45 | 0.5 | 0.05 | / | / | / | |
| 劑量2 | 4.45 | 0.5 | 0.05 | / | / | / | |
| 劑量3 | 4.45 | 0.5 | 0.05 | / | / | / | |
| 溶劑對照 | 4.45 | 0.5 | / | 0.05 | / | / | |
| 不活化 | 陽(yáng)性對照 | 4.95 | / | / | / | / | 0.05 |
| 劑量1 | 4.95 | / | 0.05 | / | / | / | |
| 劑量2 | 4.95 | / | 0.05 | / | / | / | |
| 劑量3 | 4.95 | / | 0.05 | / | / | / | |
| 溶劑對照 | 4.95 | / | / | 0.05 | / | / | |
注：24小時(shí)染毒所用陽(yáng)性底物需稀釋2倍后加入0.05 mL。
4、收獲細胞及制片
用0.25%的溶液消化細胞，加入0.075mol/路化甲溶液進(jìn)行低滲處理，固定液（甲醇：斌戳酸=3：1）進(jìn)行固定并滴片，用吉姆薩染液染色，中性樹(shù)膠封片，并于油鏡下進(jìn)行閱片，記錄畸變細胞的坐標位置及畸變類(lèi)型，具體操作方法參照國標方法進(jìn)行。
5、畸變類(lèi)型分析及結果判定
結果分析及判定可參照：473 體外哺乳動(dòng)物細胞染色體畸變試驗，《化學(xué)品測試方法·健康效應卷》（第二版），2013年，(ISBN：978-7-5111-1476-1)。
【注意事項】
1.實(shí)驗前請自行準備RPMI 1640培養液、牛血清、細胞培養瓶、24孔細胞培養板、滅菌槍頭、無(wú)菌移液管、二氧化碳培養箱、振蕩器、15、50mL離心管等，所有耗材需做無(wú)菌處理。
2.實(shí)驗操作應在符合細胞培養實(shí)驗要求的環(huán)境下進(jìn)行。
匯智泰康是一家位于中美兩地的生物醫藥合同研發(fā)機構，整合中美兩地的藥物研發(fā)技術(shù)服務(wù)平臺，基于A(yíng)AALAC、GLP、ISO/IEC 17025實(shí)驗室認證，面向很多企業(yè)及研發(fā)機構提供分析化學(xué)、DMPK、藥理藥效、生物學(xué)、以及毒理安全性評價(jià)產(chǎn)品與服務(wù)。
主要產(chǎn)品：
體外藥物代謝產(chǎn)品
Ⅰ相代謝穩定性試劑盒
Ⅱ相代謝穩定性試劑盒
CYP450酶代謝表型研究試劑盒
不同種屬肝微粒體，肝S9
重組酶，標準品，孵育系統等
遺傳毒性產(chǎn)品
Ames試劑盒
體外染色體畸變試驗試劑盒
TK基因突變試驗試劑盒
HPGRT基因突變試劑盒
彗星試驗試劑盒
誘導大鼠肝S9等
空白生物基質(zhì)
空白血清：食蟹猴，恒河猴，比格犬，大鼠，小鼠，豬，兔
空白血漿：食蟹猴，恒河猴，比格犬，大鼠，小鼠，豬，兔
空白血：食蟹猴，恒河猴，比格犬，大鼠，小鼠，豬，兔
空白尿液：食蟹猴，恒河猴，比格犬，大鼠，小鼠
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